酶离者皮肤组织单细胞解离酶MJ007是一款专门用于皮肤组织单细胞悬液制备的科研试剂。它是一款“一步即用型”的多元复合酶制剂,旨在通过温和高效的酶解作用,从人、小鼠、大鼠等动物的皮肤组织中分离出高活性、高得率的单细胞。
皮肤组织单细胞解离酶MJ007的产品特点:
1.多元复合酶配方:MJ007采用多元复合酶设计,包含8种以上的特异性组织解离酶,能够高效消化皮肤组织中的细胞间质,包括胶原纤维和弹性蛋白等,实现温和而彻底的解离。
2.操作简便:该产品只需将配套的酶干粉溶解在溶解液中,一步操作即可进行后续实验,无需像进口竞品那样进行复杂的称量、计算和混合步骤,大大减少了操作时间和出错概率。
3.解离效率高:多元复合酶MJ007的解离效率显著高于单纯使用进口胶原酶IV、DNA酶或进口竞品的三四种混合酶。大多数器官组织在10-15分钟内即可解离完全,而进口产品通常需要1小时甚至更长时间。
4.细胞得率高且活性强:由于解离效率高且时间短,MJ007能够获得高得率的单细胞悬液,同时保持细胞的活性和抗原表位的完整性。解离后的单细胞适用于单细胞测序、流式细胞分析、流式细胞分选、原代细胞培养、类器官3D培养等多种实验。
5.成本更低:作为自主研发产品,MJ007在成本上更具竞争力,能够为科研工作者提供更经济的选择。
皮肤组织单细胞解离酶的实验使用方法:
1.试剂准备:将A瓶中的酶干粉用力甩至瓶底,然后用移液枪取B瓶中的溶解液反复吹打A瓶中的酶干粉并转移至B瓶中,盖紧瓶盖上下颠倒直至酶干粉完全溶解。
2.组织收集与处理:在无菌条件下收集皮肤组织,立即置于冷的PBS中,尽可能在4小时内处理。如需放置更长时间,请使用高活性组织保存液 MJ104。将组织用冷PBS清洗1-2次以去除血液、坏死组织等杂质,并称重记录。
3.组织剪碎:将清洗过的组织转移至解离管中,用锋利眼科剪碎成1-2mm³小块,剪至泥糊状。剪得越碎酶解就越充分,单细胞酶解时间就会越短。
4.酶解组织:取适量的皮肤组织单细胞解离酶MJ007加入解离管中,上下颠倒解离管使解离酶与组织充分混匀。如配备有组织单细胞解离仪,可按照仪器操作规范进行单细胞解离;如未配备,也可进行手动解离。
5.单细胞过滤与终止酶解:待组织完全解离后,立即瞬离解离管3秒,并将解离管插在冰上。用移液枪吸取上清通过40μm的滤网进行过滤,过滤全程在冰上操作。取等量的组织单细胞酶解终止液MJ102或完全培养基进行终止酶解。
6.细胞收集与清洗:将过滤后的细胞悬液进行离心收集细胞,用预冷的PBS清洗后再离心弃上清。重复清洗2次以去除残留的酶和杂质。
7.细胞活性检测:使用台盼蓝或AOPI染色检测细胞活性,活细胞率应大于85%。
单细胞解离酶的使用注意事项
1.科研用途:该产品仅限科研使用。
2.无菌操作:若下游实验需要无菌培养,全程需在超净台内进行无菌操作。
3.温度与时间控制:酶解需在37℃进行,而其他步骤(如过滤、清洗)应在冰上操作以维持细胞活性。需密切观察解离情况,在保证效果的前提下尽可能缩短酶解时间,避免过度消化损伤细胞。
4.储存要求:溶解后的酶液在-20℃或-80℃下可保存6个月。避免反复冻融,若酶活下降可适当增加使用量。
总的来说,酶离者皮肤组织单细胞解离酶MJ007是一款针对皮肤组织特点设计的国产复合酶解离试剂。其核心价值主要在于通过专有的复合酶配方,力求在缩短解离时间的同时,提高所得单细胞的活率和质量,以满足单细胞测序等高要求下游实验的需要。
上一篇
即刻咨询
13052506670