实验背景:肌腱,作为体内高度纤维化的致密结缔组织,一直是单细胞悬液制备领域的难点。其丰富的胶原纤维和紧密的细胞外基质,对解离酶的穿透力、专一性和温和性都提出了很高要求。
实验结果:
近日,我们成功对小鼠肌腱组织进行了高质量单细胞悬液制备。该实验直面挑战,选用我司专为复杂纤维组织优化的高效解离酶试剂盒《骨骼肌组织单细胞解离酶MJ010》,历时30分钟,成功将约320mg的肌腱样本消化为可用于流式分析的单个细胞。
1.酶解离效果:从致密组织到单个细胞。
2.成功解离:经过优化的酶解离方案,成功将结构致密的肌腱组织转化为单细胞悬液。
3.流程顺畅:从终止消化到过滤、离心,流程标准,细胞获得率高。
稀释3倍效果:
核心突破:为什么我们的酶能攻克肌腱?
1.高效穿透,靶向解离:针对肌腱中富含的I型胶原等基质成分,酶系能有效穿透并特异性切割胶原纤维网络,从而释放出完整的肌腱细胞,而非通过化学暴力破坏细胞本身。
2.细胞活性强:在35分钟的标准解离时间内,既能保证对顽固组织的充分消化,又通过提前解冻、避免温热水等细节,很好地保持了酶的活性,从而保障了细胞的高活率。
3.应对组织异质性:肌腱不同区段的细胞组成和基质密度存在差异。本酶系具有良好的兼容性与稳定性,即便面对同一组织内的异质性,也能提供均一、可靠的解离效果。
关键实验洞察与建议:
1.前处理是基础:需将组织剪成糊状,增加酶的作用面积,这是成功解离的前提。
2.过程监控很重要:实验人员需在旁观察,根据组织状态灵活调整时间,避免过度消化。
3.细节决定细胞得率:避免长时间或多次清洗,以防珍贵的肌腱细胞在纯化步骤中损失。
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